一、蛋白质脱盐有哪些方法

常用的脱盐方法有透析法、电透析法和凝胶过滤法。透析法及电透析法耗时长,样品稀释度大,不易放大进行大规模生产,所以工业生产中应用较少。凝胶过滤层析脱盐过程中盐分子和蛋白质分子大小差异巨大,蛋白质溶液中小分子的盐分子随着层析流动相进入孔径较小的固定相,使其在层析中的迁移速率小,而蛋白质因分子尺寸较大,不能随流动相进入固定相中,因此在层析柱中的迁移速率大,首先从层析术中流出,实现脱盐。

用凝胶过滤法脱盐时,为了使盐同蛋白质充分地分离,除了应选用足够长的层析柱之外,还应对样品的体积加以限制。样品的体积如果过大就导致蛋白质带同盐带不能分开。一般来就,样品体积不超过床体积的30%。这一数据的确定是根据盐和蛋白质的分离体积(Vsep)决定的。两种物质分离体积的定义为,当两种物质的混合物在凝胶过滤层析柱上能够完全分离时的最小体积。

二、盐析法得到的蛋白质如何脱盐

常用的是凝胶过滤层析脱盐,利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。

蛋白质溶液中盐分子和蛋白质分子大小相差较大,盐分子较小,会随着层析流动相进入孔径较小的固定相,在层析中迁移速率小,而蛋白质分子尺寸较大,不能随流动相进入固定相,迁移速率大,首先从层析术中流出,实现脱盐。

扩展资料

盐析作用的实质是高浓度的强电解质破坏蛋白质分子表面的水化膜,同时电解质离子中和了蛋白质所带的电荷,蛋白质的稳定因素被消除,使蛋白质分子相互碰撞而凝聚沉淀。

蛋白质在水溶液中的溶解度取决于蛋白质分子表面离子周围的水分子数目,亦即主要是由蛋白质分子外周亲水基团与水形成水化膜的程度以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。

蛋白质溶液中加入中性盐后,由于中性盐与水分子的亲和力大于蛋白质,致使蛋白质分子周围的水化层减弱乃至消失。

同时,中性盐加入蛋白质溶液后由于离子强度发生改变,蛋白质表面的电荷大量被中和,更加导致蛋白质溶解度降低,之蛋白质分子之间聚集而沉淀。

由于各种蛋白质在不同盐浓度中的溶解度不同,不同饱和度的盐溶液沉淀的蛋白质不同,从而使之从其他蛋白中分离出来。简单的说就是将硫酸铵、硫化钠或氯化钠等加入蛋白质溶液,使蛋白质表面电荷被中和以及水化膜被破坏,导致蛋白质在水溶液中的稳定性因素去除而沉淀。

参考资料来源:百度百科--脱盐比

参考资料来源:百度百科--凝胶过滤层析

三、脱盐技术的几种方法

1 透析除盐; 仪器:透析袋

2 超滤除盐 ; 仪器:超滤机(Millipore)

3 凝胶除盐; 仪器:凝胶柱(如葡聚糖 G-50)

四、除了凝胶层析脱盐的方法,还有什么脱盐的方法?

你要脱盐的物质是什么呀,我讲下蛋白的吧.

1.用透析法,不过这种方法只能用于少量蛋白的脱盐.

2.可以用丙酮沉淀蛋白除盐,因为这种方法是使蛋白变性沉淀下来而除盐,这种方法可能会使部分蛋白丢失或失去活性.

3.盐析,用硫酸铵,氯化钠等中性盐等沉淀蛋白而除盐